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土著菌菌种


来源:河南中广集团 发布时间:2009-05-19 09:43:05 查看次数:


一、土著菌的产品特点


   1、外观:浅黄色粉末,略带腥臭味。  
   2、主要成分:产丝放线菌、枯草芽孢杆菌、酵母菌、乳酸菌、载体。总菌数≥200亿/克  
   3、土著菌中各种细菌的功效与作用机理:

1、土著菌中放线菌的作用机理

   
放线菌的形态比细菌复杂些,但仍属于单细胞。在显微镜下,放线菌呈分枝丝状,我们把这些细丝一样的结构叫做菌丝,菌丝直径与细菌相似,小于1微米。菌丝细胞的结构与细菌基本相同。放线菌有许多交织在一起的纤细菌体,叫菌丝。在固体营养物质上生长时,不同的菌丝分工不同,有的扎根于它们的食物中“埋头大吃”,这是专管吸收营养的营养菌丝,由于这些菌丝是生长在培养基内的,因而也称为基内菌丝;有的朝天猛长,这是由营养菌丝发育后形成的气生菌丝。放线菌长到一定阶段,便开始“生儿育女”。它们先在气生菌丝的顶端长出孢子丝,等到成熟之后,就形成各种各样形态各异的孢子。孢子的外形有的像球,有的像卵,有的像秆子,有的像瓜子。它们可以随风飘散,遇到适宜的环境,就会在那里“安家落户”,开始吸收水分和营养,萌生成新的放线菌。

   放线菌最喜欢生活在有机质丰富的微碱性土壤中,泥土所特有的“泥腥味”就是由放线菌产生的。它们中绝大多数是腐生菌,能将动植物的尸体腐烂、“吃”光,然后转化成有利于植物生长的营养物质,在自然界物质循环中立下了不朽的功勋。还有一类叫弗兰克氏菌的放线菌,生长在许多豆科植物的根瘤里,能固定大气中的氮,成为植物能利用的氮肥。除了生产抗生素外,放线菌在工业上还有许多其他贡献。例如,利用放线菌还可以生产维生素B12、-胡萝卜素等维生素,生产蛋白酶、溶菌酶,以及用于生产高果糖浆的葡萄糖异构酶等酶制剂。另外,放线菌在石油工业和污水处理等方面也可发挥一技之长。 

   放线菌的繁殖

   放线菌的培养条件

   放线菌大多数是异养菌,营养要求不是很高,可以在简单的培养基上生长起来。需要的碳源有淀粉、糊精、葡萄糖、麦芽糖和甘油等,氮源中可以利用蛋白胨、氨基酸、硝酸盐、铵盐、尿素等。而且放线菌一般都需要K、Mg、Fe、Cu、Ca等。

   其它方面的特性有,放线菌大多数是需氧菌,缺氧的情况下它不能生长,会窒息而死的。
它生长的最适温度是28-32℃,最适生长PH约为7。2-7。6,放线菌的培养时间比细菌长一些,一般都需要3-7天才能长成菌落。 

2、土著菌中枯草芽孢杆菌的作用机理
   1、枯草芽孢杆菌菌体在生长过程中产生的枯草菌素、多粘菌素、制霉菌素、短杆菌肽等活性物质对致病菌或内源性感染的条件致病菌有明显的抑制作用; 
   2、枯草芽孢杆菌能迅速消耗消化道内环境中的游离氧,形成肠道低氧环境,促进有益厌氧菌生长,并产生乳酸等有机酸类,降低肠道PH值,间接抑制其它致病菌的生长; 
   3、 枯草芽孢杆菌能刺激动物免疫器官的生长发育,激活淋巴细胞,提高免疫球蛋白和抗体水平,增强细胞免疫和体液免疫功能,提高群体免疫力; 
   4、枯草芽孢杆菌菌体能自身合成消化性酶类,如蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、纤维素酶等,在消化道中与内源酶共同发挥作用,提高饲料消化率; 
   5、枯草芽孢杆菌能合成多种维生素,提高动物体内干扰素和巨噬细胞的活性。

3、土著菌中乳酸菌的作用机理

   
乳酸菌是一种存在于人类体内的益生菌。乳酸菌能够将碳水化合物发酵成乳酸,因而得名。乳酸菌能够帮助消化,有助人体肠脏的健康,因此常被视为健康食品,添加在酸奶之内。

   乳酸菌的十大生理功能

   1、防治有色人种普遍患有的乳糖不耐症(喝鲜奶时出现的腹胀、 腹泻等症状)。
   2、促进蛋白质、单糖及钙、镁等营养物质的吸收,产生维生素B族等大量有益物质。
   3、使肠道菌群的构成发生有益变化,改善人体胃肠道功能,恢复人体肠道内菌群平衡,形成抗菌生物屏障,维护人体健康。
   4、抑制腐败菌的繁殖,消解腐败菌产生的毒素,清除肠道垃圾。
   5、抑制胆固醇吸收,降血脂、降血压作用。
   6、免疫调节作用,增强人体免疫力和抵抗力。
   7、抗肿瘤、预防癌症作用。
   8、提高SOD酶活力,消除人体自由基,具抗衰老、延年益寿作用。
   9、有效预防女性泌尿生殖系统细菌感染。
   0、控制人体内毒素水平,保护肝脏并增强肝脏的解毒、排毒功能。

二、
土著菌的概念: 


   
土著菌就生活在我们周围的自然环境中,走进阔叶树林或竹林,在落叶且腐殖质多地方,扒开树叶或杂草就可以看到细丝壮白色菌落,这就是有益的土著微生物。
   土著微生物是多种有益微生物的混合群,土著微生物按好嫌气性分有好气菌、嫌气菌;按菌种分有酵母菌、曲霉菌、放线菌、乳酸菌、芽孢菌等。
   可以在不同的季节、不同的地点采集不同的菌种。采集到的原始菌种应放在室内阴凉、干燥处保存。
   活性好的土著菌可以用由人工培养、扩陪成纯度高的微生物菌群!   
   土著菌发酵床养猪技术、养鸡技术是利用自然环境中的生物资源,采集土壤中的多种有益微生物进行培养扩繁,使其形成有相当活力的微生物母种,再按一定比例将微生物母种与锯木屑等辅料和活性剂混合发酵形成有机垫料。让猪、鸡从小到大都生活在这种有机垫料上,猪、鸡的排泄物被有机垫料里的微生物迅速降解、消化,不需进行人工处理,达到零排放。    

三、
土著菌的采集方法 :
 

   
1、采集地方:可以在当地山上落叶聚集较多的山谷、树林中采集。 
   2、具体办法:把做的稍微有一点硬的大米饭(1kg~1.5kg),装入用干净杉木板做的小木箱(25cm×20cm×10cm)约三分之一,大米饭上面盖上宣纸,封好口,将其埋在当地山上落叶聚集较多的山谷树林中。为防止野生动物糟蹋,木箱最好罩上铁丝网。夏季经三~五天,春秋经六~七天,周边的土著微生物潜入到米饭中,在米饭上形成白色菌落(放置时间稍长时会形成各种颜色菌落,虽然也能利用,但最好还是用白色菌落)。 
   3、扩陪方法:土著菌采集成功后掺入原材料量1/3左右的红糖,将其混合均匀(数量按坛子容量的三分之一),把变的稀软状态的米饭装入坛子里,盖上宣纸,用线绳系好口,放置在温度18℃左右地方。大约放置7天左右,就会变成浓稠液体状态,饭粒多少会有些残留,但不碍事。简单过滤后就是土着微生物菌种原液。 用的时候直接稀释后和EM菌种原液一起使用!

    以下步骤适用于菌种生产单位实验室!普通用户可以不做!

   4、提纯复壮: 有条件的可以在实验室进行

   
一般情况下,采来的样品可以直接进行分离,但是如果样品中我们所需要的菌类含量并不很多,而另一些微生物却大量存在。此时,为了容易分离到所需要的菌种,让无关的微生物至少是在数量上不要增加,即设法增加所要菌种的数量,以增加分离的几率。可以通过选择性的配制培养基(如营养成分、添加抑制剂等),选择一定的培养条件(如培养温度、培养基酸碱度等)来控制。具体方法是根据微生物利用碳源的特点,可选定糖、淀粉、纤维素,或者石油等,以其中的一种为唯一碳源,那么只有利用这一碳源的微生物才能大量正常生长,而其他微生物就可能死亡或淘汰。对G一菌有选择的培养基(如结晶紫营养培养基、红—紫胆汁琼脂、煌绿胆汁琼脂等)通常含有5%~10%的天然提取物。在分离细菌时,培养基中添加浓度一般为50μg/m1的抗真菌剂(如放线菌酮和制霉素),可以抑制真菌的生长。在分离放线菌时,通常于培养基中加入1~5m1天然浸出汁(植物、岩石、有机混合腐质等的浸出汁)  作为最初分离的促进因子,由此可以分离出更多不同类型的放线菌类型;放线菌还可以十分有效地利用低浓度的底物和复杂底物(如几丁质),因此,大多数放线菌的分离培养是在贫脊或复杂底物的琼脂平板上进行的,而不是在含丰富营养的生长培养基上分离的;在放线菌分离琼脂中通常加入抗真菌剂制霉菌素或放线菌酮,以抑制真菌的繁殖;此外,为了对某些特殊种类的放线菌进行富集和分离,可选择性地添加一些抗生素(如新生霉素)。在分离真菌时,利用低碳/氮比的培养基可使真菌生长菌落分散,利于计数、分离和签定;在分离培养基中加入一定的抗生素如氯霉素、四环素、卡那霉素、青霉素、链霉素等即可有效地抑制细菌生长及其菌落形成;抑制细菌的另外一些方法有:在使用平皿之前,将平皿先干燥3~4天;降低培养基的pH值或在无法降低pH时,加入1:30000玫瑰红。这样有利于下阶段的纯种分离。

   通过增殖培养,样品中的微生物还是处于混杂生长状态。因此还必须分离,纯化。在这一步,增殖培养的选择性控制条件还应进一步应用,而且要控制得细一点,好一点。同时必须进行纯种分离,常用的分离方法有稀释分离法、划线分离法和组织分离法。稀释分离法的基本方法是将样品进行适当稀释,然后将稀释液涂布于培养基平板上进行培养,待长出独立的单个菌落,进行挑选分离。划线分离法要首先倒培养基平板,然后用接种针(接种环)挑取样品,在平板上划线。划线方法可用分步划线法或一次划线法,无论用哪种方法,基本原则是确保培养出单个菌落。组织分离法主要用于食用菌菌种或某些植物病原菌的分离。分离时,首先用10%漂白粉或0.1%升汞液对植物或器官组织进行表面消毒,用无菌水洗涤数次后,移植到培养皿中的培养基上,于适宜温度培养数天后,可见微生物向组织块周围扩展生长。经菌落特征和细胞特征观察确认后,即可由菌落边缘挑取部分菌种进行移接斜面培养。

   对于有些微生物如毛霉、根霉等在分离时,由于其菌丝的蔓延性,极易生长成片,很难挑取单菌落。常在培养基中添加0.1%的去氧胆酸钠或在察氏培养基中添加0.1%的山梨糖及0.01%的蔗糖,利于单菌落的分离。

   经过分离培养,在平板上出现很多单个菌落,通过菌落形态观察,选出所需菌落,然后取菌落的一半进行菌种鉴定,对于符合目的菌特性的菌落,可将之转移到试管斜面纯培养。这种从自然界中分离得到的纯种称为野生型菌株,它只是筛选的第一步,所得菌种是否具有生产上的实用价值,能否作为生产菌株,还必须采用与生产相近的培养基和培养条件,通过三角瓶的容量进行小型发酵试验,以求得适合于工业生产用菌种。这一步是采用与生产相近的培养基和培养条件,通过三角瓶的容量进行小型发酵试验,以求得适合于工业生产用菌种。如果此野生型菌株产量偏低,达不到工业生产的要求,可以留之作为菌种选育的出发菌株。 

【注意事项】
 
  1、本品为活菌制剂,细菌活性较强,应密闭阴凉避光保存。
  2、禁止与抗生素、杀虫剂、杀菌剂、消毒剂、强酸强碱类产品混合使用。
  3、使用本品时免疫程序正常进行。
 
【有效日期】3年
 
【包装规格】20公斤/ 件

【贮藏办法】阴凉干燥处密封保存

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